Абицин
Абицин представляет собой изоморфную смесь генуинных гликозидов, так называемый комплекс ланатозидов (дигиланидов) ABC (ланатозид A:R = R1 = H; ланатозид В: R = OH R1 = Н; ланатозид С: R = Н R1 = ОН), выделяемую из однолетних листьев первого года культуры наперстянки шерстистой, собранных осенью до наступления холодов.
Абицин — кристаллический порошок белого цвета, т. разл. не ниже 235° (метод 1, ГФ, т. X, с. 766), [a]d от +33 до +34,5° (С= 1,8 в этаноле); практически нерастворим в воде и эфире, трудно растворим в 95° спирте, очень мало растворим в хлороформе.
Биологическая активность: 1 г препарата должен содержать 14000— 16500 ЛЕД или 27000—3000 КЕД.
На сердце теплокровных абицин действует подобно гликозидам наперстянки красной: усиливает систолу, удлиняет диастолу, увеличивает амплитуду сердечных сокращений, урежает ритм сердца, усиливает диурез.
Абицин уже в течение первых суток заметно влияет на пульс и диурез, хорошо переносится больными, лучше всасывается из кишечного тракта ,чем дигитоксин.
Абицин рекомендуется применять при недостаточности кровообращения II и III степени различной этиологии, тахисистолической форме мерцательной аритмии, суправентикулярной форме параксимальной тахикардии.
Форма выпуска: таблетки по 0,00025 г, 0,02% раствор для инъекций и 0,05% раствор для приема внутрь.
Экстракция гликозидов 90° метанолом. В экстрактор, снабженный ложным дном, заправленным сукном, мешалкой, делающей 60 об/мин, рубашкой для обогрева и холодильником, загружают через боковой и верхний люки неизмельченные листья наперстянки шерстистой.
Из смесителя с помощью азота подают 90° метанол. Экстракцию проводят при комнатной температуре в течение 3 ч при работающей мешалке. По окончании времени Метанольный экстракт сдавливают с помощью вакуума через друк-фильтр, заправленный бязевым фильтром в сборник. Экстракцию сырья повторяют еще раз при тех же параметрах. По окончании экстракции в рубашку аппарата подают пар и ведут отгонку метанола от шрота. Отгон метанола используют для экстракции гликозидов из сырья.
Упаривание метанольных экстрактов. Метанольный экстракт из сборника с помощью сжатого инертного газа передают в мерник, далее к роторному пленочному испарителю (РЖ-160-0,8), где ведут упарку метанольного экстракта до 1/10 первоначального объема со скоростью 180—200 л/ч, при давлении пара в рубашке I —1,5 атм и остаточном давлении в системе 100—150 мм рт. ст.
В кубовый остаток добавляют обессоленную воду (1:3) и ведут доупарку в вакуум-циркуляционном аппарате до удельного веса конденсата, близкого к единице (0,97—0,98) .Доупарку ведут при остаточном давлении 100—150 мм рт. ст. и подаче текучего пара в калорифер аппарата. Водный кубовый остаток фильтруют через нутч-фильтр с бязевым фильтром от выпавших смолистых комочков, осадок на фильтре промывают обессоленной водой. Фильтрат передают на следующую стадию технологического процесса.
Очистка упаренного экстракта. Кубовый остаток с помощью вакуума забирают в делительную воронку с мешалкой. Подают равный объем четыреххлористого углерода, и содержимое воронки перемешивают в течение 10 мин, затем оставляют на 20 мин в покое для разделения слоев. Нижний слой сливают в сборник, в аппарат подают свежую порцию четыреххлористого углерода в количестве 1/3 от объема обрабатываемого водного кубового остатка. Экстракцию ведут в тех же условиях, что и первую экстракцию. Всего экстракций 8—10.
Отработанный четыреххлористый углерод передают на регенерацию, отгон используют на этой же стадии.
Экстракция гликозидов смесью хлороформа с изопропиловым спиртом. Очищенный водный раствор гликозидов передают в другую делительную воронку ,где проводят экстракцию гликозидов из водного раствора смесью хлороформа с изопропиловым спиртом в отношении 3: 1. На первую экстракцию берут смеси 2/3 от объема обрабатываемого водного раствора, на последующие— 1/3. Перемешивание содержимого воронки 20 мин, «отстаивание для разделения слоев 15 мин. Всего экстракций 8—10 (до отрицательной реакции Легаля в водном р-ре и смеси растворителя). Реакция Легаля: 2 мл смеси растворителя после обработки водного раствора помещают в фарфоровую чашечку и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток растворяют в 1—2 мл метанола, переносят в пробирку, в которую приливают 1 мл 5% водного раствора нитропруссида натрия и 1—2 капли 10% водного раствора едкого натра: появляется постепенно исчезающее красное окрашивание (сердечные гликозиды). Водный раствор проверяют так же, только исключают его упаривание.
Отработанный водный кубовый остаток сливают в канализацию, а хлороформно-изопропанольные извлечения объединяют и передают на следующую стадию технологического процесса.
Упаривание хлороформно-изопропанольных извлечений. Хлороформно-изопропанольный экстракт упаривают в вакуум-циркуляционном выпарном аппарате при параметрах: давление пара не более 0,3 атм, остаточное давление в аппарате 75—150 мм рт. ст. В конце упаривания в аппарат добавляют определенный объем обессоленной воды и упаривание продолжают до полного удаления хлороформа. По окончании упаривания кубовый остаток сливают в бутыль и передают на следующую стадию технологического процесса.
Очистка на окиси алюминия. Стеклянная колонна для хроматографим высотой 600 мм, в диаметре 300 мм, с нижним спуском для работы готовится следующим образом: на конусное дно укладывается вставка с сеткой из нержавстали, на сетку укладываются два круга из марли (по величине сетки) или капроновой сетки № 32, настилается ровный слой ваты и присыпается слой в 2—3 см сухой окиси алюминия. В бачке из нержавстали готовят 50% метанол.
Окись алюминия II степени активности всыпают в бачок (из расчета 100 г окиси алюминия на 1 кг листьев наперстянки), хорошо суспендируют и переносят в колонну для хроматографии. Окись алюминия в колонне оседает, чистый 50% метанол стекает в бачок до верхнего уровня окиси алюминия. 50% метанол используют для элюирования и промывки колонны после пропускания через него основного раствора гликозидов.
Упаренный хлороформно-изопропанольный экстракт разбавляют равным объемом метанола, затем его объем доводят 50% метанолом до определенного объема, хорошо перемешивают и пропускают через колонну с окисью алюминия. Когда закончится пропускание через слой окиси алюминия (когда уровень основного раствора сравняется с верхним уровнем окиси алюминия в колонне), гликозиды элюируют из окиси алюминия 50% метанолом до полного исчезновения гликозидов в элюате (отрицательная реакция Легаля), на что расходуется примерно разный объем основного раствора 50% метанола. Элюаты объединяют и передают на упарку в вакуум-циркуляционном выпарном аппарате. Упарку ведут при давлении пара не более 0,3 атм и остаточном давлении в системе 75—150 мм рт. ст. Упарку ведут до удельного веса конденсата, близкого к единице. Отгон метанола используют на этой же стадии. Кубовый остаток после упаривания элюата передают на следующую стадию технологического процесса.
Экстракция гликозидов этилацетатом и получение технического абицина. Водный кубовый остаток, полученный после отгонки метанола из водно-метанольного элюата, с помощью вакуума передают в стеклянный реактор, в него же на первую экстракцию загружают этилацетат и с помощью вакуума энергично перемешивают содержимое реактора в течение 10 мин. Затем в течение 20 мин раствор отстаивается для разделения слоев. Отстоявшийся нижний водный слой сливают в бачок, а верхний (этилацетатный слой) сливают в другой бачок, затем в реактор возвращают водный слой, добавляют новую порцию этилацетата и процесс повторяют. Всего проводят 9 экстракций (до отрицательной реакции Легаля). Объединенные этилацетатные извлечения упаривают в вакуум-циркуляционном выпарном аппарате до небольшого объема.
Упаривание ведут при параметрах: давление пара в калорифере не более 0,3 атм, остаточное давление в системе 75—150 мм рт. ст. Отгон этилацетата используют на этой же стадии для последующих загрузок. Кубовый остаток сливают в коническую колбу, добавляют равный объем дистиллированной воды, содержимое колбы хорошо перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 дней для кристаллизации абицина.
В случае необходимости иа 2 и 3-й день в колбу вносят затравку абицина в количестве 30—50 мг. За 3—4 дня до отделения выпавшего в осадок абицина колбу помещают в холодильную камеру, где выдерживают при 5°С. По истечении времени технический абицин отфильтровывают на стеклянном фильтре с пористой пластинкой 3. осадок на фильтре промывают небольшим количеством охлажденной до 5°С дистиллированной воды, хорошо отжимают на фильтре, переносят в кристаллизатор, разрыхляют и высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50—60° в течение 3—4 ч.
Выход от начала процесса — 25.4%.
Перекристаллизация технического абицина *. Растертый в ступке порошок абицина переносят в круглодонную колбу из термостойкого стекла, добавляют 5 объемов 96,5% этанола на одну весовую часть абицина. Колбу с обратным холодильником помещают на кипящую водяную баню, где нагревают содержимое бани до полного растворения осадка. После этого колбу снимают с бани и осторожно вносят в нее небольшими порциями осветляющий активный древесный порошкообразный уголь в количестве 5% от веса технического абицина. Колбу вновь ставят на водяную баню с обратным холодильником и содержимое кипятят 10 мин.
Горячий спиртовый раствор фильтруют через воронку Бюхнера через два слоя фильтровальной бумаги.
Профильтрованный раствор в колбе Бунзена (закрыв горло ватномарлевым тампоном) помещают в холодильник и выдерживают при температуре 5° в течение 18—20 ч, затем осадок абицина отфильтровывают на стеклянном фильтре с пористой пластинкой № 3.
Осадок на фильтре хорошо отжимают и промывают небольшим количеством охлажденного этанола, отжимают, переносят в кристаллизатор, взрыхляют и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50—60° в течение 5—6 ч (до постоянного веса).
Выход на стадии (с учетом обработки маточников) 85%.
Выход от начала процесса — 21,6%.
* Для производства целанида используют технический абицин без предварительной перекристаллизации. При выпуске же товарного абицина в регламенте предусмотрена стадия перекристаллизации.